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陕北枣ISSR反应体系的建立及其优化
作者: 王延峰 [1,2] ; 史妮妮 [1] ; 李永鑫 [1] ; 叶飞 [1] ; 贺晓龙 [1] ; 陈国梁 [1]
关键词: 枣 反应体系 ISSR
摘要:以陕北地方品种枣树叶片为材料,对影响ISSR反应体系的因子进行优化,研究了TaqDNA聚合酶单位数、引物浓度及退火温度对扩增过程的影响。结果表明:在25μL ISSR反应体系中各组分为1×PCR buffer,12.9μL Easy PCR ystem,0.4μmol/L引物,DNA模板50 ng,1.5 U TaqDNA聚合酶,且退火温度为54.8℃时,PCR的扩增效果最佳;筛选出的引物序列S46重现性好、多态性明显,对11种枣树幼叶的模板DNA进行扩增都能产生清晰、稳定的特征带谱。