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红薯过氧化物酶的纯化与性质测定
作者: 吴娟 [1] ; 金晨钟 [1,2] ; 刘姝梅 [1] ; 胡一鸿 [1]
关键词: 红薯 过氧化物酶 纯化 稳定性
摘要：以红薯块根为材料,对红薯中的过氧化物酶进行提取、分离、纯化并测定其性质。结果表明：经40%～80%饱和度的硫酸铵分级分离、Sephadex G-100凝胶过滤、Concanavalin A亲和层析三个步骤,获得纯化的红薯过氧化物酶,酶纯化倍数为26.56倍,回收率0.92%,比活性3841.80 U/mg,SDS-PAGE电泳显示酶分子量为23 kDa。红薯过氧化物酶以愈创木酚为底物时λmax=470 nm,Km=3.031 mmol/L,酶的最适pH值为5.0,最适温度是35℃。酶的热稳定性较高,60℃保温20 min,残存相对活性为72.40%;酶的低温贮存稳定性很高,0～4℃冰箱中贮存20 d后,残存相对活性为97.28%。