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菰均一化全长cDNA文库的构建
作者: 臧剑 颜育民 张志刚 邹世湘 彭琼 广东菰稻农业有限公司 广东广州511400 湖南杂交水稻研究中心 湖南长沙410125 湖南旺湘隆农业有限公司 湖南长沙410125 湖南省农业生物技术研究中心 湖南长沙410125
关键词: 菰 均一化 CDNA 文库 功能基因
摘要：为了获得国家二级保护植物品种菰的功能基因信息，并克隆功能基因片段，研究以SMART（switchingmechanismat5endofRNAtranscript）方式合成菰全长cDNA，结合DSN（duplex-specificnuclease）均一化技术，构建菰叶片组织的均一化全长cDNA文库。该cDNA文库库容量大，达到了3.6×106PFU/mL，插入片段平均长度为1000bp，重组率为97.9%。均一化全长cDNA文库能有效富集低丰度表达基因，降低冗余率，适用于目的基因的筛选，以及后续的基因、蛋白互作分析。
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